Generación de librería de nanoanticuerpos (VHH)

Generación de librería de nanoanticuerpos (VHH)

Los nano anticuerpos, anticuerpos VHH o anticuerpos de dominio simple es una prometedora tecnología de anticuerpos terapéuticos de nueva generación para la inmunoterapia del cáncer y otras aplicaciones. Los nano anticuerpos (VHH) se distinguen de otros formatos de anticuerpos convencionales por sus propiedades únicas de tamaño, solubilidad, estabilidad intrínseca, fácil adaptación a construcciones pluripotenciales, reconocimiento de epítopos poco comunes u ocultos, unión a cavidades o sitios activos de dianas enzimáticas, facilidad y rapidez en el descubrimiento de fármacos y facilidad de fabricación.

Biointron es una empresa líder reconocida en el campo del descubrimiento de anticuerpos de dominio simple o único. Basándose en nuestra avanzada tecnología de visualización de fagos, nuestros científicos están especializados en la producción y el desarrollo de anticuerpos de dominio único específicos.

Nuestras ventajas

Criadero propio de alpacas

más de 100 alpacas disponibles

Más de 20 Carpetas únicas garantizadas

métodos combinados de panificación en fase sólida y en fase líquida

Alta diversidad y gran capacidad

múltiples bibliotecas generadas después de la 2ª, 3ª y 4ª inmunización

Diagrama de trabajo de la generación de bibliotecas de anticuerpos VHH

Expresión del antígeno proporcionada por el cliente

Expresión del antígeno proporcionada por el cliente

Imunización del animal

Imunización del animal

Aislamiento PBMC

Aislamiento PBMC

Extracción de ARNm y Transcripción inversa

Extracción de ARNm y Transcripción inversa

Generación de la librería

Generación de la librería

Cribado de bibliotecas y biopanning a medida (paneo en fase sólida y paneo en fase líquida)

Cribado de bibliotecas y biopanning a medida (paneo en fase sólida y paneo en fase líquida)

Secuenciación del clon positivo y análisis de la secuencia

Secuenciación del clon positivo y análisis de la secuencia

Expresión VHH

Expresión VHH

Consulte Con Nuestro Personal

Detalle de servicio de generación de bibliotecas de anticuerpos VHH

Pasos a seguirDescripciónPeriodo de tiempoPrecioEntregable
Fase I: Preparación del anticuerpo/Validación del anticuerpoEl antigeno puede ser preparado por Biointron o suministrado por nuestro cliente2 semanas de preparación/2-3 días para validación

A Consulta

  • 1mg de antígeno proteico purificado

  • Si el antígeno es proporcionado por el cliente, tendrá que cumplir las siguientes condiciones (al menos 4mg con SDS-PAGE >95%, nivel de endotoxina<1EU/mg

Fase II: Inmunización de la alpaca y aislamiento PBMC/Conservación

  • 5ml de sangrado preinmune

  • El título ELISA después de la 2ª, 3ª y 4ª inmunización se controlará y el informe se enviará al cliente

  • Los 50 ml PMBC después de la 2ª, 3ª y 4ª inmunización  serán extraídos y almacenados en Trizol.

8-10 semanas

  • Si el antígeno provoca la muerte de la alpaca, habrá una tasa de aprox. 5.000 dólares por la cuota de instalación

  • Toma de decisión: basada en el título Elisa de la segunda, tercera y cuarta inmunización. Nuestro cliente puede decidir que célula utilizar para la generación de la biblioteca. 

Fase III: Generación de bibliotecas de fagos

  • Extracción de ARN y preparación de ADNc

  • Amplificación de VHH

  • Electrocompetencia de E.Coli

  • Medición de la diversidad y la capacidad de la biblioteca

  • Cuenta del número de clones y secuenciación para medir la capacidad de la biblioteca

3-4 semanasLa capacidad de VHH llega a los 109
Hito 4: Biopanificación y cribado de la biblioteca

  • Al menos 3 rondas de cribado (tanto en fase líquida como en fase sólida)

  • Verificación del ELISA, identificación y evaluación de los clones positivos (a 200 clones para la secuenciación) cribado

  • Secuenciación de clones positivos y análisis de los resultados de la secuenciación

3-4 semanasGarantizar el suministro de al menos 20 secuencias únicas.
Producción de anticuerpos VHH-Fc (opcional)

  • Síntesis de genes, subclonación, preparación de plásmidos

  • Expresión y purificación transitoria

  • Análisis de Control de Calidad

2 semanasAnticuerpo purificado (SDS-PAGE>95%, nivel de endotoxina >1 EU/mg)
Clasificación por afinidad (opcional)Afinidad medida por Biacore 8k0.5 semanas
Nota: Si el título de ELISA después de la 4ª inmunización es <1:5.000, sugeriremos terminar el proyecto y solo cobramos la tarifa de la fase I y la fase II.